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構建的載體表達出現(xiàn)問題
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| 我最近構建了一個載體 用的是PET22-b,酶切位點是HindIII、NdeI把質粒上的信號肽切除了,誘導條件是OD=0.6 IPTG=0.1mM 30℃ 16h 最后測酶活很低,跑蛋白發(fā)現(xiàn)破碎后的沉淀目的蛋白比上清濃度高,可能出現(xiàn)包涵體 我又重復了1次 總是出現(xiàn)包涵體 請教各位大神 怎么不出現(xiàn)包涵體呀?我想提高酶活。。。。 |
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