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用酶法測定燕麥種子中的β-葡聚糖含量,顯色液用的GOPOD 已有2人參與
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用酶法測定燕麥種子中的β-葡聚糖含量,顯色液用的GOPOD,酶標儀510nm測定吸光度,葡萄糖標曲的OD值為何比空白的要低呢? 葡萄糖濃度μg/ml 0 100 200 300 400 空杯子 510nm吸光值 0.041900001 0.041299999 0.042100001 0.041999999 0.0405 0.048300002 我做了三次,都是標曲的0值是最5個值里邊最大的,我現(xiàn)在找不到問題,懷疑是試劑有問題,準備重新配試劑,再做一次,GOPOD的配置 :葡萄糖試劑緩沖(儲備)液:稱取34g 磷酸二氫鉀、10.5g 氫氧化鈉和7.5g 對羥基苯甲酸在室溫下溶解在200ml 的水中。用2mol/L 的鹽酸或2mol/L 的氫氧化鈉調(diào)整溶液的pH 至7.4,然后加入1g 的疊氮鈉。用水調(diào)整體積至250ml。在4℃下暗處貯存,至少穩(wěn)定1 2 個月。 葡萄糖試劑緩沖工作液:量取50ml葡萄糖試劑緩沖(儲備)液, 用水調(diào)整體積至1000ml,加入80mg 4- 氨基非那宗,10mg 過氧化酶和200mg 葡萄糖氧化酶,溶解并置于棕色瓶內(nèi),在4 ℃下暗處貯存,該溶液穩(wěn)定3 個月。 這個葡萄糖氧化酶加200mg的酶活力單位應該是多少啊,查文獻查不到,求助求助求助! |
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