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lrxczy鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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瞬轉(zhuǎn)真核細(xì)胞表達(dá)蛋白后分子量大了一倍，是什么原因？
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| 我構(gòu)建了兩個(gè)重組質(zhì)粒pEGFP-C1-F和pEGFP-C1-H，plojet瞬轉(zhuǎn)hela細(xì)胞，在不同時(shí)間點(diǎn)用GFP抗體檢測(cè)蛋白表達(dá)，發(fā)現(xiàn)表達(dá)后的F和H蛋白比在大腸桿菌和網(wǎng)上預(yù)測(cè)的蛋白分子質(zhì)量大了一倍，我已經(jīng)考慮GFP標(biāo)簽的大小了，還是打了一倍，比如F蛋白帶上GFP標(biāo)簽應(yīng)該是50KD左右，現(xiàn)在變成了90多KD，是什么原因呢？對(duì)于后續(xù)檢測(cè)蛋白的功能有沒(méi)有影響呢？非常感謝�。�！ |
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4樓2016-05-09 19:38:39
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我現(xiàn)在做的就是變性的電泳，但是變性電泳應(yīng)該是把蛋白的結(jié)構(gòu)都打開(kāi)了啊，如果有二聚體也應(yīng)該是打開(kāi)的呀，還原性電泳不變性，更應(yīng)該是二聚體折疊的結(jié)構(gòu)吧…… 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
5樓2016-05-09 20:05:46
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8樓2016-05-10 05:46:28
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謝謝！我分析過(guò)后應(yīng)該怎樣驗(yàn)證呢？是不是糖蛋白，是不是二聚體，應(yīng)該用什么樣的實(shí)驗(yàn)方法驗(yàn)證？ 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
9樓2016-05-11 06:54:39
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