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WO要的夢(mèng)鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
C18柱的柱效下降得很厲害,有什么方法可以恢復(fù)嗎? 已有2人參與
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最近開始做液相,用C18柱篩選流動(dòng)相,用過(guò)兩次含有三乙胺(用量很少)的流動(dòng)相,還用過(guò)兩次緩沖液PH為2.5的流動(dòng)相,每次用甲醇和水沖柱子半小時(shí),然后用甲醇沖半小時(shí)封柱。 目前用的是含有緩沖鹽PH4.0的流動(dòng)相,今天做液相的時(shí)候,發(fā)現(xiàn)藥物的出峰時(shí)間差距特別大,相鄰兩次進(jìn)樣的出峰時(shí)間相差0.2,出峰時(shí)間從8.2依次變成8.4,8.6,8.7,8.9。 應(yīng)該是柱效變差了,可是這是什么原因造成的呢?是因?yàn)槭褂昧巳野罚是之前用的PH2.5的緩沖液酸度太大,還是沖柱子時(shí)間太短了呢。 另外,目前的情況應(yīng)該怎么解決呢?我準(zhǔn)備用10%的甲醇水溶液沖柱過(guò)夜,能改善柱效下降的問(wèn)題嗎。難道只能重新?lián)Q柱子嗎? 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
新蟲 (小有名氣)

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你的色譜柱ph范圍是多少?峰形變差了嗎,壓力升高了嗎,塔板數(shù)降低了嗎,等度還是梯度,個(gè)人感覺是不是你平衡時(shí)間太短。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
鐵蟲 (初入文壇)
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PH范圍應(yīng)該是2到8吧, 把柱子沖了一段時(shí)間,重新做液相的時(shí)候,發(fā)現(xiàn)柱子已經(jīng)恢復(fù)正常了,不過(guò)確實(shí)所需的平衡時(shí)間較長(zhǎng)。 前一次測(cè)定的時(shí)候,開始進(jìn)樣的時(shí)間應(yīng)該是早了 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
實(shí)習(xí)版主 (職業(yè)作家)
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專家經(jīng)驗(yàn): +1209 |
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色譜柱是有PH使用范圍的,過(guò)酸或過(guò)堿都會(huì)降低柱效……使用緩沖鹽,一定要注意用前過(guò)渡,用后沖洗……還有就是要平衡時(shí)間足夠…… 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
銅蟲 (小有名氣)
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