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ahooxmc新蟲 (初入文壇)
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[求助]
SDS-PAGE M形 鬼帶原因是什么 已有1人參與
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最近做SDS-PAGE（好久沒有做過(guò)了），樣品是原核表達(dá)的蛋白上清液（超濾管濃縮，并除鹽）和菌體超聲破碎后上清液（超濾管濃縮，并除鹽），15% 分離膠。 電泳結(jié)果顯示菌體破碎蛋白最前端的蛋白（小分子的）都呈現(xiàn)M形條帶，鄰近的上清蛋白及Marker 都相對(duì)正常？ 有人遇到這種情況不，神馬原因？ M shaped.jpg |
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superwenli
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8樓2016-05-27 20:31:38
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2樓2016-05-25 13:49:08
7樓2016-05-27 19:57:31
jiangronglu
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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分離膠太短，濃縮膠濃度好了，另外上樣時(shí)菌體需要處理，可以煮沸10min，如果很稠的話可以采用離心，取上清上樣，順便控制上樣量，12000轉(zhuǎn)離心10min后上就OK了 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
9樓2016-05-28 07:38:28
沉默、顏淚
木蟲 (正式寫手)
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首先,Marker條帶挺好，膠配置比較均勻。其次，你的樣品量太高！但是，一般來(lái)說(shuō)，樣品量過(guò)高，影響蛋白的分離效果（分不開）。你這樣的情況，真第一次見！我個(gè)人認(rèn)為:應(yīng)該是小分子蛋白的原因，一，濃度實(shí)在太高；二，變性劑加少了或者煮沸變性不充分，三、該條帶的蛋白自身有問(wèn)題。祝好運(yùn)！ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
10樓2016-05-29 00:59:04
hc-material
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4樓2016-05-25 15:07:41
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5樓2016-05-26 18:25:41
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6樓2016-05-27 11:41:00
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