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陳蟲蟲銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于兩種不同物質(zhì)的生物樣品處理方法的優(yōu)化 已有3人參與
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| 最近在做一個很糾結(jié)的實驗，要從生物樣品中提取三種物質(zhì)出來，其中兩種是弱堿性物質(zhì)，脂溶性很好，一種是對堿性及敏感物質(zhì)，水溶性很好，現(xiàn)在采取蛋白沉淀法，用甲醇、乙腈、乙醇、丙酮都試過，但是提取回收率都不高，而且RSD好多也不行�，F(xiàn)在正在努力思考想嘗試下用混合得有機溶劑是否有用，不知各位大神對這個方法的優(yōu)化有什么想法沒？因為不是專業(yè)做這個的，做到現(xiàn)在都是一頭霧水。望大神們指點�。。� |
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2樓2016-05-26 12:07:34
陳蟲蟲
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3樓2016-05-26 12:58:47
清涼__小吊帶
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蛋白沉淀適合水溶性物質(zhì)，液液萃取適合脂溶性物質(zhì)。樓主可以嘗試下先蛋白沉淀再液液萃取，有可能會降低基質(zhì)效應(yīng)，提高重現(xiàn)性。另外，重現(xiàn)性不一定不好不一定就是樣品處理方法的問題，也有可能是檢測儀器本身重現(xiàn)性的問題。也有可能是樣品處理操作人員的問題。我覺得應(yīng)該綜合考慮。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2016-05-28 14:47:15
cjx521
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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你可以試試在有機溶劑中加點揮發(fā)性酸，比如甲酸，加的的量不要過大，否則蛋白沉淀不干凈，大約0.2％，如果有用的話，再具體摸一下加酸量 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2016-05-28 19:56:05
陳蟲蟲
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7樓2016-05-30 21:04:07
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8樓2016-05-30 21:04:33
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【答案】應(yīng)助回帖
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萃取上清液。就是把上清液當(dāng)成血漿，正常進(jìn)行液液萃取操作。其實沉淀蛋白以后不需要分離出來，渦旋以后直接進(jìn)行液液萃取操作就可以了。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
9樓2016-05-31 08:07:30
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