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關(guān)于細胞給藥前,要換無血清培養(yǎng)基,饑餓24小時的問題,求指教!
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樓主在做細胞分組給藥,收集上清,elisa測蛋白含量的實驗。因為組里沒人做過這個,樓主查了一些博士的畢業(yè)論文,較有代表性的有“細胞調(diào)整密度,接種于細胞板,培養(yǎng)24小時后,等到細胞平穩(wěn)生長到70%-80%融合后,換無血清DMEM培養(yǎng)基,靜息24h,再給藥。”樓主就先做了一個預實驗,細胞長到80%左右換成無血清培養(yǎng)基,第二天發(fā)現(xiàn),細胞全部長滿長過了,漂了不少。 所以想請教下各位有經(jīng)驗的細胞實驗戰(zhàn)友, 1.換無血清培養(yǎng)基,讓細胞靜息,意義是什么,我可以直接用含血清的培養(yǎng)基配藥給藥麼? 2.還有就是...因為我的實驗最后的時間點是48小時,我發(fā)現(xiàn)細胞70%時給藥,24小時后細胞就長到滿滿的了,48小時觀察細胞長得超級擠,上清漂了一層密密麻麻的圓細胞,這時再收集樣本是不是太晚了? 3.最后問個題外問題,童鞋們,一般是先做時效曲線還是量效曲線呢? 求童鞋們指教一下! ![]() ![]() |
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