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質(zhì)粒切不開 已有4人參與
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內(nèi)切酶用的XbaI，位于我的目的基因兩邊，測(cè)序結(jié)果表明酶切位點(diǎn)序列正確，兩邊也沒有甲基化位點(diǎn)，想用XbaI進(jìn)行酶切，但調(diào)整質(zhì)粒濃度，酶量，反應(yīng)體系，酶切時(shí)間，更換新的內(nèi)切酶，始終切不開，求教各位高手 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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3樓2016-05-30 07:52:44
tfytli
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你用的哪個(gè)公司的酶？多大的體系？質(zhì)粒及酶的用量是多少？這些細(xì)節(jié)要說清楚我們才好判斷。這個(gè)酶我常用，沒有切不開的情況，算是比較常用的酶。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2016-05-29 23:07:32
tfytli
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你用同樣的酶量和質(zhì)粒量，換50微升體系試試，切的時(shí)間盡量長(zhǎng)一點(diǎn)。用的酶量不應(yīng)超過體系的十分之一，會(huì)影響酶切效果。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2016-05-30 09:15:54
lx910615
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5樓2016-05-31 07:17:23
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