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小木蟲論壇-學術(shù)科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » DNA重組 » 表達載體
| 查看: 1237 | 回復(fù): 15 | ||
yuan720222新蟲 (初入文壇)
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表達載體 已有2人參與
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| 目的片段插入到雙元表達載體中，經(jīng)過轉(zhuǎn)化后，在抗氯霉素的培養(yǎng)基中不能長斑，已經(jīng)做了很長時間了，不知道大神們有沒有遇到過這種現(xiàn)象，我的目的片段為5000bp，載體片段為11000bp,是不是因為片段過大，不容易連接成功？我用的T4酶進行連接的。 |
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3樓2016-06-04 17:56:54
gin_starwind
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片段確實大了點，不好連。有必要的話換個感受態(tài)菌種試試，或考慮利用同源重組。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2016-06-04 17:38:44
15113546664
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2016-06-06 19:48:18
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請問內(nèi)切酶切的時候位點有沒有搞錯，或者只用一種酶切，環(huán)化的可能性很高，空載體，也可能是目的基因的確太大了，換個載體，看看是表達載體還是克隆載體， 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2016-06-05 00:11:18
yuan720222
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6樓2016-06-05 08:03:27
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8樓2016-06-05 09:33:43
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9樓2016-06-05 11:56:01
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10樓2016-06-05 21:06:29
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