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如何鑒定數(shù)據(jù)庫中的目的基因是否是全長序列
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| 研究3個同工酶基因,因為是putative的,所以不知道數(shù)據(jù)庫中的序列是否是該基因的全長,應該如何鑒定呢?其次,用該基因的蛋白序列反推cDNA序列,并轉(zhuǎn)化了煙草,但是一直鑒定不到蛋白表達(western blot檢測的HA,載體構(gòu)建的時候在基因后面加了HA序列),有沒有可能是因為不是基因的全長,所以基因沒有表達成蛋白,所以western做不出來呢?如果是基因不是全長導致的,那么下一步是做RACE保險呢還是做個酵母表達更穩(wěn)妥呢?因為想把該基因轉(zhuǎn)化到植物中。謝謝了! |

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