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sdjnyxn123銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
請(qǐng)問(wèn)抑菌實(shí)驗(yàn)中的病原菌濃度如何確定 已有1人參與
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我最近將表達(dá)的蛋白產(chǎn)物（抗菌肽類、溶菌酶等）和溶菌酶成品、氨芐青霉素等做抑菌實(shí)驗(yàn) 最后的實(shí)驗(yàn)結(jié)果除了氨芐有不錯(cuò)的抑菌圈之外其他幾乎都看不到抑菌圈 只有溶菌酶的成品對(duì)兩種芽孢桿菌有很小的抑菌圈 這時(shí)才想到用量的問(wèn)題 我的氨芐青霉素濃度是50mg/mL 溶菌酶成品是10mg/mL 這濃度應(yīng)該很高了吧，我看別人做的抑菌實(shí)驗(yàn)中用量都是0.1mg/mL的溶菌酶···· 我病原菌一般都是取100uL接到900uL LB培養(yǎng)基里培養(yǎng)10h就拿出來(lái)用了，兩層瓊脂，上面一層加200uL，之后用牛津杯做 是不是受濃度影響太大了？ 1.想問(wèn)一下做這種抑菌實(shí)驗(yàn)所要求的病原菌濃度如何確定呢？是0.5的麥?zhǔn)蠞岫葐幔?br /> 2.查了一下粗略算的話。0.5麥?zhǔn)蠞岫纫簿褪?.5*10^8 CFU/mL,OD625大約在0.8~1.3即可 其他人做的文獻(xiàn)里沒(méi)有完全按照0.5麥?zhǔn)蠞岫葋?lái)的，有一個(gè)同樣做溶菌酶的文章里用的濃度是1.5*10^9 他的細(xì)菌濃度是如何測(cè)定的呢？涂板培養(yǎng)的話黃花菜都涼了吧 試了一下用血球計(jì)數(shù)板測(cè)不了 有沒(méi)有好用的測(cè)定細(xì)菌濃度的辦法呢？ |
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kangyu91
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2樓2016-10-12 14:34:09
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4樓2021-07-07 16:05:40
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