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[交流]
trizol法采用純化柱提取細(xì)胞中RNA的一些問題，
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我們做RNA提取有一段時間，之前是選用試劑盒的方法提取RNA，現(xiàn)在我想用TRIZOL法嘗試一下，步驟如下 加1ml trizol裂解細(xì)胞5min，轉(zhuǎn)移到2ml離心管中，加200μl 氯仿震搖30s，4℃靜置5min，12000rpm離心10min 取上清液等體積加入異丙醇到一新的2ml離心管中，室溫靜置10min（還有說-20℃放置2h），下一步我選擇的是純化柱過柱離心12000rpm，2min 加入700μl 75%異丙醇 離心12000rpm，2min 加入40μl RNase Free Water之后開始測RNA濃度 想請教一下這個過程RNA會降解嗎？需要注意哪些問題？之前用試劑盒的方法加入巰基乙醇防止RNA降解，現(xiàn)在可以加入嗎？在哪一步加合適 |
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19樓2016-06-14 10:22:25
21樓2016-06-14 14:21:03
23樓2016-06-15 10:54:33
24樓2016-06-15 15:37:48
25樓2016-06-15 22:33:33
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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實驗過程中帶一次性口罩，手套，帽子進行實驗，手是RNase的主要來源，實驗過程勤換手套。實驗過程保持在低溫條件下進行，操作迅速，及時更換槍頭。這些就能盡量減少RNase對RNA的降解 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
26樓2016-06-16 00:46:13
27樓2016-06-16 13:53:05
28樓2018-11-28 14:07:13
簡單回復(fù)
hydzp2樓
2016-06-13 16:28
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fdzjm3樓
2016-06-13 16:35
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祝福 發(fā)自小木蟲IOS客戶端
psylhh4樓
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2016-06-13 16:46
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skyish6樓
2016-06-13 16:46
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一 發(fā)自小木蟲IOS客戶端
2016-06-13 16:50
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2016-06-13 16:51
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假大空9樓
2016-06-13 16:54
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zhaoyan197810樓
2016-06-13 17:07
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xhmaohan12樓
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caledonian13樓
2016-06-13 18:57
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Jameskelly14樓
2016-06-13 19:22
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syhorchid15樓
2016-06-13 19:25
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tableman16樓
2016-06-14 00:32
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虎躍龍騰17樓
2016-06-14 00:33
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wudi201518樓
2016-06-14 08:35
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50477549020樓
2016-06-14 13:53
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博雅未名812822樓
2016-06-15 00:03
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