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wuwanghua新蟲 (初入文壇)
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[求助]
新人求問關(guān)于抗原抗體的相互作用問題----我的抗體是不是出現(xiàn)問題了呀？？？？ 已有1人參與
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實(shí)驗(yàn)新人，對(duì)抗體領(lǐng)域不太了解，求問抗體是不是受到緩沖液的影響很大，緩沖液中有10mM的鎂離子等，具體如下： 我想做修飾有Dig的DNA和Anti-Digoxin antibody 相互作用來實(shí)現(xiàn)信號(hào)的變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有無Anti-Digoxin antibody體系的信號(hào)并不發(fā)生變化，我的體系基本原理是可行的，也通過修飾有生物素的DNA和鏈霉親合素的體系得到驗(yàn)證（該體系加與不加鏈霉親合素是有信號(hào)變化的）。 我的體系是在37℃條件下的，Anti-Digoxin antibody買的是GeneTex的一抗， Anti-Digoxin mouse monoclonal antibody，200ul 0.5mg/ml，我用1*PBS進(jìn)行稀釋使用并將其加入到體系中進(jìn)行測(cè)定，我的體系的buffer的組成為：50 mM 醋酸鉀 20 mM Tris-acetate 10 mM 醋酸鎂 100 μg/ml BSA pH 7.9 @ 25°C，不知道為什么生物素-鏈霉親合素體系可行而Dig和Anti-Digoxin antibody的抗原抗體體系卻行不通？？ 我處理Anti-Digoxin antibody的方式有問題？？ Anti-Digoxin antibody抗體壞了？？ buffer中的鎂離子或者離子強(qiáng)度使該抗體失效了？？？37℃是該抗原抗體作用的適宜溫度？？？ 求問各位大俠 |
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2樓2016-06-15 15:35:06
wuwanghua
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3樓2016-06-15 15:50:19
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