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農桿菌介導的轉化實驗若干問題 已有1人參與
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各位大神，今天做農桿菌介導轉化大麗輪枝菌實驗問題，其中用到IM和MM兩種培養(yǎng)基，不同的文獻感覺配方各有差異，不知道有沒有哪位成功做過的給一個配方，另外，配制的時候添加順序是什么？ 我們實驗室用的配方是： MM：葡萄糖2g，KH2PO4 1.45g，K2HPO4 2.05g，NH4NO3 0.5g，CaCl2 0.01g，MgSO4.7H2O 0.6g，NaCl 0.3g，5ml Z-Salts（10ml Z-Salts包含：ZnSO4.7H2O 0.001g，CuSO4.5H2O 0.001g，H3BO4 0.001g，(NH4)2SO4 0.5g，MnSO4.H2O 0.001g，NaMoO4.H2O 0.001g），用HCl調pH至6.7-7.0. IM：5ml Z-Salts，98%MES 8.7g，葡萄糖2g，甘油5g，乙酰丁香酮AS 200μM，用HCl調pH至5.4； 不知道配方有沒有問題，另外，MM配制的時候，添加順序怎么加，我一起加進去的時候全是混濁的了，還有就是MES能一起加到培養(yǎng)基滅菌嗎？還是和AS一樣過濾滅菌？謝謝 |
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2樓2017-06-28 10:04:50
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