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luanmanedved銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于磷酸三脂酶(有機(jī)磷水解酶)表達(dá)純化的問題
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本人想表達(dá)純化PTE(OPH)之后進(jìn)行突變,但表達(dá)純化階段就出現(xiàn)問題。 公司合成基因,按照文獻(xiàn)里的方式連接到PET-28a質(zhì)粒上,表達(dá)后包涵體很多,純化出的酶很少。同時(shí)也嘗試了其他幾種PET載體,而且優(yōu)化了誘導(dǎo)條件,發(fā)現(xiàn)沒有明顯的提高?求助各位做過這方面實(shí)驗(yàn)的高手還有什么方式?更換其他載體么? |
銅蟲 (小有名氣)
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