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反對(duì)派銀蟲 (正式寫手)
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[交流]
試管內(nèi)合成cDNA雙鏈時(shí)（T-A）組成的雙鏈由什么酶去掉？ 已有1人參與
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請(qǐng)教各位同行：試管內(nèi)合成cDNA雙鏈時(shí)，DNA聚合酶I 延伸后，會(huì)形成連續(xù)的（T-A）n組成的雙鏈。這個(gè)雙鏈最后是由什么酶去掉的？ 望不吝賜教為謝！ |
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xn8008
至尊木蟲 (知名作家)
Balance Angel
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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| 不知道你說(shuō)的去除TA是什么意思，是不是指第一鏈合成的過(guò)程，你看看PCR三個(gè)步驟的名稱就明白了，還有，第一鏈被逆轉(zhuǎn)錄完成之后,通過(guò)其中一種引物可以結(jié)合聚合出互補(bǔ)鏈,接下來(lái)的過(guò)程就是普通的PCR的過(guò)程了。之所以在RT的過(guò)程中只合成第一鏈,因?yàn)镽T過(guò)程是需要逆轉(zhuǎn)錄酶,工作溫度37℃,同時(shí)使用的是隨機(jī)引物或者是oligo-dT；而PCR過(guò)程使用高溫DNA聚合酶,工作溫度72℃,同時(shí)使用的是特異的擴(kuò)增引物.兩個(gè)體系沒(méi)有辦法同時(shí)進(jìn)行,就分開(kāi)來(lái)做,那逆轉(zhuǎn)錄自然就只轉(zhuǎn)錄第一鏈了 |
2樓2016-06-30 13:37:57
反對(duì)派
銀蟲 (正式寫手)
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- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
2016-06-30 16:18:30
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4樓2016-06-30 16:25:02
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