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yml11新蟲 (初入文壇)
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[交流]
質(zhì)粒提取 已有6人參與
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各位大神們，小妹請(qǐng)教一個(gè)問題。我從DH5a中提重組質(zhì)粒pET-32a-目的片段，一直都提不出來呀，用的是天根的小質(zhì)粒提取試劑盒來做的。請(qǐng)問是什么原因，該怎么辦呢？ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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你的試劑盒有沒有問題啊？可以做個(gè)對(duì)照，換種質(zhì)粒提一下。還有就是，你的DH5α確定含有質(zhì)粒嗎？會(huì)不會(huì)是假陽性？再者就是你確定你操作沒問題嗎？很多小細(xì)節(jié)都會(huì)影響提取效率。還有就是你怎么確定你的質(zhì)粒沒有提取出來的？是測(cè)濃度還是跑膠驗(yàn)證？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2016-07-01 19:48:46
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重組質(zhì)粒第一步需要鑒定出正確克隆，然后過夜培養(yǎng)提質(zhì)粒，你提質(zhì)粒的菌液OD值應(yīng)該為2——4。另外你現(xiàn)在選的感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率沒有全是金的T1轉(zhuǎn)化效率高，不行可以換它 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
3樓2016-07-02 07:44:38
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試劑盒應(yīng)該沒問題，之前提原始的質(zhì)粒都能提出來的�，F(xiàn)在就是在想是不是假陽性呢，送公司測(cè)序也說測(cè)不出來 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
4樓2016-07-02 17:30:35
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