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小李紙11銀蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
只導(dǎo)入目的片段的感受態(tài)細(xì)胞能正常生長(zhǎng)及復(fù)制基因嗎？ 已有1人參與
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| 將目的片段連接至T載體后導(dǎo)入DH5α感受態(tài)，然后長(zhǎng)出白斑，挑了幾個(gè)提了質(zhì)粒，但是質(zhì)粒大小有兩種情況，一種和目的片段差不多大，一種遠(yuǎn)大于目的片段，我想知道只導(dǎo)入目的片段的感受態(tài)細(xì)胞能正常生長(zhǎng)及復(fù)制基因嗎？ |
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ls2046
鐵桿木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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目的片段（一般含抗性基因，不含質(zhì)粒backbone）本來(lái)就可以直接用于轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞能，這在大腸桿菌和酵母里已經(jīng)是一種常用的分子實(shí)驗(yàn)手段了。但是這種情況，目的片段只有整合至宿主染色體上才能正常生長(zhǎng)及復(fù)制基因，并不會(huì)游離存在。也就是說(shuō)是提不出質(zhì)粒的。 像你試驗(yàn)中遇到的情況應(yīng)該不屬于此類。還是實(shí)驗(yàn)本身有問(wèn)題，分子實(shí)驗(yàn)結(jié)果有時(shí)候很難去徹底的解釋清楚。 對(duì)了，你做酶切了沒(méi)有？不酶切的話，什么都說(shuō)明不了。 |
2樓2016-07-05 09:33:08
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