 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1707 | 回復: 0 | ||
[求助]
流感病毒HA，NA測序問題（菜鳥傾盡金幣求助~~~）
|
|
菜鳥我生物本科學歷，今年6月初開始的測定流感病毒HA，NA的序列工作。因之前專門到做此試驗的專業(yè)部門去學習過，試劑盒都按學習時采購的。我們的大概流程是：病毒總RNA的提取，反轉錄，cDNA擴增（PCR），電泳鑒定。。。。。。為什么至寫到這里，因為只做到這，就遇到問題，無法向下開展了。 問題： 總的問題：沒有得到目的條帶（HA：1700bp，NA：1400bp） 提取RNA是用試劑盒提取的，提取后進行RNA電泳得到如下條帶： ![\"流感病毒HA](\"https://muchongimg.xmcimg.com/data/bcs/2016/0705/w145h3387723_1467686072_457.png#opennewwindow\") 而后進行RTPCR，PCR擴增后進行DNA電泳得到如下條帶： ![\"流感病毒HA，NA測序問題（菜鳥傾盡金幣求助~~~）-1\"](\"https://muchongimg.xmcimg.com/data/bcs/2016/0705/w139h3387723_1467686150_413.png#opennewwindow\") 如圖所示，并沒有得到我們想要的1400bp和1700bp的條帶。 而后我多次調整退火溫度，甚至更換新的引物（學習時，相同毒種可以P出來的引物），都沒有得到目的條帶。菜鳥我實在分析不出原因，現(xiàn)傾盡菜鳥的金幣（雖然也少得可憐  ）求助大神予以指導~~~此外，菜鳥還有些問題求助大神們： 問題1：學習時測序所用流感毒種取自于雞胚尿囊液，現(xiàn)在所測毒種為細胞培養(yǎng)增值的流感病毒，二者在RNA提取的過程中是否應有所不同？ 問題2：≤250bp甚至＜100bp片段的出現(xiàn)大多由什么原因引起？引物二聚體？還是引物特異性不好呢？還是有別的什么原因? 請各位大神不吝指導，拜托了�。�！ |
回復此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有179人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
-
留學--博士招生
已經(jīng)有16人回復
-
化學工程，本211，求調劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復
-
邵陽學院食品與化學工程學院碩士調劑
已經(jīng)有0人回復
-
湖北師范大學招調劑啦
已經(jīng)有3人回復
» 本主題相關商家推薦: (我也要在這里推廣)
相關版塊跳轉
我要訂閱樓主 生物界菜鳥 的主題更新
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085701環(huán)境工程求調劑 +11 | 多久上課 2026-03-27 | 12/600 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 083000學碩274求調劑 +9 | Li李魚 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京化工大學材料與化工（085600）296求調劑 +25 | 稻妻小編 2026-03-26 | 25/1250 |
|
|
[考研] 346求調劑 一志愿070303有機化學 +7 | 蘿卜燉青菜 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 327求調劑 +5 | 小卡不卡. 2026-03-29 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 309求調劑 +15 | 誰不是少年 2026-03-29 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 0703化學/290求調劑/本科經(jīng)歷豐富/工科也可 +13 | 丹青奶蓋 2026-03-26 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 296求調劑 +10 | 彼岸t 2026-03-29 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 275求調劑 +15 | Micky11223 2026-03-25 | 20/1000 |
|
|
|
[考研] 考研調劑 +7 | 小蠟新筆 2026-03-29 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 299求調劑 +10 | 15188958825 2026-03-25 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 一志愿南京航空航天大學材料學碩求調劑 +3 | @taotao 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料求調劑一志愿哈工大324 +7 | 閆旭東 2026-03-28 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 張芳銘-中國農(nóng)業(yè)大學-環(huán)境工程專碩-298 +4 | 手機用戶 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿上海理工能源動力（085800）310分求調劑 +3 | zhangmingc 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調劑 +4 | 零八# 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 調劑推薦 +5 | 清酒714 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 341求調劑 +7 | 青檸檬1 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 081200-11408-276學碩求調劑 +3 | 崔wj 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 285求調劑 +3 | AZMK 2026-03-24 | 3/150 |
|