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lx910615新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
western blot 求助，熒光猝滅的很快，請(qǐng)各位指點(diǎn)一二。 已有3人參與
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| 求助，破碎菌體得胞內(nèi)蛋白，做western,1抗（自制）1：2000 搖床1h，4℃過(guò)夜，TBST洗膜6次/10min, 二抗1：5000 1.5h,TBST洗膜3次/10min,TBS洗一次。碧云天ECL發(fā)光液1：1，熒光猝滅的很快，請(qǐng)各位指點(diǎn)一二。 |
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ericyo918
至尊木蟲(chóng) (知名作家)
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3樓2016-07-15 14:28:13
314300420
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- 專業(yè): 抗體工程學(xué)
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猝滅有兩種，一種是膜上結(jié)合的HRP太多，導(dǎo)致底物快速耗盡，此時(shí)膜上會(huì)留下黃褐色條帶的印跡，另一種是有ECL液體時(shí)在發(fā)光，吸掉后很快熒光消失，這種情況是有污染物存在，別問(wèn)我具體是什么污染，我也不清楚 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
lx9106152樓2016-07-14 17:45:55
lx910615
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4樓2016-07-16 12:40:04
lx910615
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5樓2016-07-16 12:40:24
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