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PCR最近跑不出來！ 已有1人參與
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| 做熒光定量的預(yù)實驗。提取的RNA反轉(zhuǎn)錄，大約有90ng的RNA反轉(zhuǎn)錄，RNA跑膠條帶清楚。但是由于樣本比較多，反轉(zhuǎn)錄操作比較慢。這是背景。用的引物以前做過預(yù)實驗，不過當(dāng)時的模板質(zhì)量很好，濃度也大，PCR跑出來了，當(dāng)時退火60度。如今用60度跑不出來，引物濃度做了稀釋，10uM，1uM ，0.1uM ，0.25 uM ，0.1uM也跑不出來。引物的Tm 55左右。PCR 的體系是實驗室公用的，不會有問題。求大神指點。 |
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2樓2016-08-01 09:53:05
wangyou136
銀蟲 (小有名氣)
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3樓2016-08-04 10:59:34
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