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xiaomao225新蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
蛋白純化 已有5人參與
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做純化，蛋白不能反復(fù)凍容，那我離心收集的菌體能從-20拿出來(lái)，放到室溫讓它溶解嗎？ @飛約瘋?cè)嗽?/u> 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
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huaizhenkai
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2樓2016-08-01 18:49:20
磁珠
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3樓2016-08-02 19:15:00
小小細(xì)胞啊
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xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2016-08-03 07:33:30
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我們一般都是菌收了以后分裝幾管理，一個(gè)個(gè)純化，摸了條件以后再全部處理 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
4樓2016-08-02 19:37:23
c269315986
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我也是剛開(kāi)始做蛋白表達(dá)純化，加個(gè)好友多多交流~ 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
5樓2016-08-02 21:03:50
夏天的普洱茶
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7樓2016-08-03 11:07:47
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8樓2016-08-03 11:20:14
shouyiyiming
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 原核表達(dá)蛋白么？菌體的話(huà)，很多人都是先凍融幾次再超聲的。我通常加完溶菌酶37度裂解半個(gè)小時(shí)左右就直接冰浴超聲了。個(gè)人感覺(jué)蛋白沒(méi)有那么容易降解的。能分裝最好，但是如果每次需要量少，個(gè)人感覺(jué)凍融幾次也沒(méi)啥影響。純化后的蛋白可以加少許甘油存放。反正我純化后的蛋白用來(lái)做ELISA包被抗原，每次只用一點(diǎn)，凍融過(guò)好多次，ELISA結(jié)果沒(méi)啥變化，測(cè)過(guò)濃度也沒(méi)啥太大變化，沒(méi)感覺(jué)有降解。個(gè)人經(jīng)驗(yàn)，僅供參考。 |
9樓2016-08-04 15:57:23
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