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xiaoliu7735新蟲 (初入文壇)
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[求助]
免疫pcr的原理看不懂，求解！
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免疫PCR主要由兩個(gè)部分組成，第一部分的免疫反應(yīng)類似于普通的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)的測(cè)定過程;第二部分即通常的PCR檢測(cè)，抗原分子的量最終由PCR產(chǎn)物的多少來反映。第一步中，首先用待測(cè)抗原(如牛血清白蛋白(BSA))包被微滴板孔，再加入相應(yīng)的特異抗體，于是抗體就與固相上的抗原結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物，蛋白A-鏈親合素(Protein A-Streptavidin)嵌合體(重組融合蛋白)中的蛋白A部分可與固相上抗原抗體復(fù)合物中的抗體IgG結(jié)合，而鏈親合素部分可與生物素化的pUC19(質(zhì)粒DNA) (Biotin-pUC19)中的生物素反應(yīng)，從而將特定的DNA間接吸附于固相。接下來，就是第二步中的PCR過程，第一步中吸附于固相的pUC19質(zhì)粒DNA在相應(yīng)的引物存在下，可經(jīng)PCR在幾小時(shí)內(nèi)而放大數(shù)百萬倍，PCR產(chǎn)物的多少與固相上抗原的量成正比。 上面是網(wǎng)頁、文獻(xiàn)中常引用的免疫PCR的原理內(nèi)容，我的問題是：為什么PCR的產(chǎn)物多少與固相上抗原的量成正比？擴(kuò)增的是DNA片段，又沒有擴(kuò)增抗原。 |
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