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煙雨斜飛

新蟲 (小有名氣)

[求助] 多糖的單糖組成分析

在多糖的單糖成分分析中,利用高效液相色譜法分析單糖種類及比例。其中將各單糖標(biāo)準(zhǔn)品混合后,進(jìn)行HPLC分析。請(qǐng)問:
       (1)出峰時(shí)間有先后,怎樣判斷哪一時(shí)間出現(xiàn)的峰對(duì)應(yīng)是哪一種標(biāo)準(zhǔn)單糖?
       (2)分析出多糖中所含的單糖種類后,怎樣計(jì)算各單糖的比例?
        新手,請(qǐng)各位大俠不吝賜教。!感謝各位大俠!
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cgjlove

專家顧問 (著名寫手)

【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★
煙雨斜飛: 金幣+4, ★★★很有幫助 2016-08-11 18:09:07
引用回帖:
3樓: Originally posted by 煙雨斜飛 at 2016-08-10 22:05:24
還想請(qǐng)問一下您:
(1)如果一個(gè)一個(gè)進(jìn)樣的話,怎樣才能做出下面這樣的圖呢(截取文獻(xiàn)里面的一張圖)?
(2)計(jì)算單糖比例的時(shí)候,可以直接利用軟件進(jìn)行封面街計(jì)算么?不做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
多謝了!

R7`)PL4970K7 ...

(1)下面的是混標(biāo)的圖,一個(gè)一個(gè)進(jìn)樣只能得到一個(gè)個(gè)單峰,你把標(biāo)品混在一起就能跑出那個(gè)圖了
(2)不做標(biāo)曲肯定不行,相同濃度的不同種單糖相應(yīng)的峰面積不一樣的。所以標(biāo)曲是肯定要的。
4樓2016-08-10 22:37:31
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cgjlove

專家顧問 (著名寫手)

【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與,應(yīng)助指數(shù) +1
煙雨斜飛: 金幣+8, ★★★很有幫助, 謝謝! 2016-08-10 22:06:00
shenyingbin: 金幣+2, 謝謝精彩回答,請(qǐng)多回帖。 2016-08-15 17:07:58
(1)如果實(shí)驗(yàn)室沒有做過那你可以單糖標(biāo)品一個(gè)一個(gè)進(jìn)樣根據(jù)出峰時(shí)間就可以判定了,要是實(shí)驗(yàn)室做過根據(jù)出峰時(shí)間次序就能知道是哪種單糖。
(2)做不同濃度單糖標(biāo)曲,可以根據(jù)峰面積算出來的
2樓2016-08-10 19:12:54
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w911227

木蟲 (正式寫手)

【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與,應(yīng)助指數(shù) +1
煙雨斜飛: 金幣+4, ★★★很有幫助 2016-08-11 18:09:43
煙雨斜飛: 金幣+4, ★★★很有幫助 2016-08-11 18:10:12
shenyingbin: 金幣+2, 謝謝精彩回帖。 2016-08-15 17:08:41
最準(zhǔn)確的就是先一個(gè)一個(gè)進(jìn)樣,確定各單糖的出峰的時(shí)間,也可以參考文獻(xiàn),一般實(shí)驗(yàn)條件相同單糖的出峰順序也一樣,然后進(jìn)混標(biāo),做標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)各單糖的濃度與峰面積的關(guān)系推算出計(jì)算各單糖比例。峰面積由液相自動(dòng)積分獲得不是更簡(jiǎn)單。
苦難的日子終將逝去,但強(qiáng)者卻永存
5樓2016-08-11 08:52:39
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ody2004

至尊木蟲 (著名寫手)

【答案】應(yīng)助回帖

買每個(gè)單糖做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
如果你要是有離子色譜,更好用。hplc對(duì)有些單糖分的不是特別好。
6樓2016-08-11 18:10:53
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普通回帖

煙雨斜飛

新蟲 (小有名氣)

引用回帖:
2樓: Originally posted by cgjlove at 2016-08-10 19:12:54
(1)如果實(shí)驗(yàn)室沒有做過那你可以單糖標(biāo)品一個(gè)一個(gè)進(jìn)樣根據(jù)出峰時(shí)間就可以判定了,要是實(shí)驗(yàn)室做過根據(jù)出峰時(shí)間次序就能知道是哪種單糖。
(2)做不同濃度單糖標(biāo)曲,可以根據(jù)峰面積算出來的

還想請(qǐng)問一下您:
(1)如果一個(gè)一個(gè)進(jìn)樣的話,怎樣才能做出下面這樣的圖呢(截取文獻(xiàn)里面的一張圖)?
(2)計(jì)算單糖比例的時(shí)候,可以直接利用軟件進(jìn)行封面街計(jì)算么?不做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
多謝了。
多糖的單糖組成分析
R7`)PL4970K7VMCXRXIYEEV.png

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3樓2016-08-10 22:05:24
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煙雨斜飛

新蟲 (小有名氣)

引用回帖:
2樓: Originally posted by cgjlove at 2016-08-10 19:12:54
(1)如果實(shí)驗(yàn)室沒有做過那你可以單糖標(biāo)品一個(gè)一個(gè)進(jìn)樣根據(jù)出峰時(shí)間就可以判定了,要是實(shí)驗(yàn)室做過根據(jù)出峰時(shí)間次序就能知道是哪種單糖。
(2)做不同濃度單糖標(biāo)曲,可以根據(jù)峰面積算出來的

嗯,資料也顯示,可先根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,由峰面積計(jì)算質(zhì)量濃度。下面一張圖,是我從一篇文獻(xiàn)里面截取下來的,但是劃紅線的部分,看了好久也沒看懂,請(qǐng)大俠賜教!
多糖的單糖組成分析-1
JA8~I`90L@T5E@%9K`JZT%4.png

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7樓2016-08-11 18:12:44
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煙雨斜飛

新蟲 (小有名氣)

引用回帖:
6樓: Originally posted by ody2004 at 2016-08-11 18:10:53
買每個(gè)單糖做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
如果你要是有離子色譜,更好用。hplc對(duì)有些單糖分的不是特別好。

哦哦 ,謝謝提點(diǎn)哈!
把握時(shí)間,做有意義的事情,加油!!
8樓2016-08-11 18:14:25
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煙雨斜飛

新蟲 (小有名氣)

引用回帖:
5樓: Originally posted by w911227 at 2016-08-11 08:52:39
最準(zhǔn)確的就是先一個(gè)一個(gè)進(jìn)樣,確定各單糖的出峰的時(shí)間,也可以參考文獻(xiàn),一般實(shí)驗(yàn)條件相同單糖的出峰順序也一樣,然后進(jìn)混標(biāo),做標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)各單糖的濃度與峰面積的關(guān)系推算出計(jì)算各單糖比例。峰面積由液相自動(dòng)積 ...

在文獻(xiàn)里面發(fā)現(xiàn)下面的信息,但是沒看懂劃線部分,請(qǐng)賜教!謝了哈!
多糖的單糖組成分析-2
JA8~I`90L@T5E@%9K`JZT%4.png

把握時(shí)間,做有意義的事情,加油!
9樓2016-08-11 18:17:48
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w911227

木蟲 (正式寫手)

引用回帖:
9樓: Originally posted by 煙雨斜飛 at 2016-08-11 18:17:48
在文獻(xiàn)里面發(fā)現(xiàn)下面的信息,但是沒看懂劃線部分,請(qǐng)賜教!謝了哈!

JA8~I`90L@T5E@%9K`JZT%4.png
...

他的意思是說做標(biāo)準(zhǔn)曲線的時(shí)候橫坐標(biāo)用的是標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量濃度,也就是mg/mL,所以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出來的是單糖的質(zhì)量比例,但是一般我們?cè)谡撐闹惺褂玫臅r(shí)候計(jì)算的是各單糖的摩爾比例,所以需要將質(zhì)量比例換算成摩爾比例
苦難的日子終將逝去,但強(qiáng)者卻永存
10樓2016-08-12 08:59:46
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