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zhaoyonggang銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
如何從轉染了pcDNA3.1質粒的HEK293T中抽提質粒
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| 我最近在做一個實驗，從瞬轉了pcDNA3.1質粒的HEK293T中回收質粒，應為pcDNA3.1帶SV40 ori，應該是可以短期內在細胞內大量復制的，所以我預期應該回收效率不低。但是實際上，我在電轉HEK293T兩天后，用酚/氯仿法抽提質粒（用了Glycogen助沉淀），然后轉化大腸桿菌（轉化效率應該也沒有問題，有陽性對照），換算下來1萬個HEK293T細胞中純化的質粒只能轉化長出<200個大腸桿菌克隆。效率似乎太低了。有哪位做過類似實驗嗎，效率是否高？有經驗可以傳授一下嗎？多謝！ |
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