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寒星jy新蟲 (初入文壇)
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[求助]
雙熒光素酶檢測實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)問題 已有2人參與
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第一次做這種實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菣z測不同啟動(dòng)子對同種轉(zhuǎn)錄因子活性的影響,現(xiàn)在已經(jīng)把轉(zhuǎn)錄因子序列構(gòu)建到上pCDNA3.1載體了,啟動(dòng)子也已經(jīng)構(gòu)建到了PGL3-basic載體上,導(dǎo)師說接下來要求用雙熒光素酶檢測。有如下一個(gè)疑問: 1.用設(shè)計(jì)對照組么?如果用怎么設(shè)置陰性對照組和陽性對照組? 本人第一次做雙螢光素酶檢測實(shí)驗(yàn),如果大家有什么好的想法或建議,請教一下,謝謝。 |
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金蟲 (小有名氣)
鐵蟲 (小有名氣)
| 肯定要設(shè)對照組的 陰性對照 就用pCDNA3.1 空載 陽性對照 確定你在測定的時(shí)候 實(shí)驗(yàn)步驟 操作是沒問題的 可以使用已經(jīng)報(bào)道的 有確定轉(zhuǎn)錄激活作用的 轉(zhuǎn)錄因子和啟動(dòng)子 一般這種都有現(xiàn)成的 如果證明你的轉(zhuǎn)錄因子有轉(zhuǎn)錄活性 可以 做個(gè)梯度 轉(zhuǎn)染,就是不同濃度的轉(zhuǎn)錄因子DNA轉(zhuǎn)染量 |

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