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小木蟲論壇-學術(shù)科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 生物科學 » 蛋白/酶 » 分子提取方法
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分子提取方法
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蛋白提取 貼壁細胞總蛋白提取 1、培養(yǎng)于35mm培養(yǎng)皿的細胞融合至80%左右。 2、細胞培養(yǎng)皿置于冰上，吸去培養(yǎng)液。 3、加入2ml預冷PBS液，洗滌細胞2-3次。 *應在冰上操作，最后盡可能吸干殘留的PBS液。 4、加入100ul預冷蛋白裂解液，用細胞刮刀沿培養(yǎng)皿壁刮細胞。 5、用1ml移液器槍頭吸刮好的細胞裂解液，放入1.5ml離心管中。 6、冰上孵育15min。 7、超生破碎。 8、4℃，15000rpm，10min。 9、取上清液，轉(zhuǎn)移至新的1.5ml離心管中。 10、取少量樣本進行蛋白定量，分裝-80℃保存。 |
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