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求大家?guī)兔Α腟IGMA 買(mǎi)的T6884-100UN的thrombin (from human plasma) 要怎么稀釋? 用什么Buffer? 用多少Buffer稀釋到多大濃度合適? 它的單位怎么由U換算到濃度單位mol/L?

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1樓 2016-08-31 21:19:44

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114110050: 金幣+5, 謝謝啦！ 2016-09-01 14:48:18

我用的是PBS，稀釋到多少濃度看你想測(cè)多少濃度，最大濃度的100倍左右就行，小濃度使用的時(shí)候逐級(jí)稀釋。
買(mǎi)的有寫(xiě)活性大于多少U/mg，根據(jù)你買(mǎi)的100U，大致得到質(zhì)量mg，再根據(jù)分子量大概在36000左右，得到摩爾量。

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2樓2016-09-01 09:32:12

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olea

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sigma有說(shuō)明的，1 NIH unit = 0.324 ±0.073 μg，一個(gè)vial是133 NIH，就是43ug左右，除以分子量36000，差不多一共1.2 nmol，按比例稀釋就行。

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4樓2016-09-01 16:05:27

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2樓: Originally posted by olea at 2016-09-01 09:32:12
我用的是PBS，稀釋到多少濃度看你想測(cè)多少濃度，最大濃度的100倍左右就行，小濃度使用的時(shí)候逐級(jí)稀釋。
買(mǎi)的有寫(xiě)活性大于多少U/mg，根據(jù)你買(mǎi)的100U，大致得到質(zhì)量mg，再根據(jù)分子量大概在36000左右，得到摩爾量。

太謝謝您了。還有個(gè)地方不太清楚，向您請(qǐng)教哈。我買(mǎi)的藥品上寫(xiě)著T6884-100 UN. lyophilized powder, >2,000 NIH units/mg protein (E%/280,18.3), 133 NIH units/vial; 2582 NIH units/mg protein. 您說(shuō)的活性大于多少U/mg是我這里藥品上寫(xiě)的>2,000 NIH units/mg protein這個(gè)嗎？如果我要計(jì)算是不是就用(2,000 U/mg X 100 U) / 36000這個(gè)式子計(jì)算呀？這里計(jì)算的時(shí)候需不需要換算單位？謝謝您了！

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3樓2016-09-01 14:47:03

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4樓: Originally posted by olea at 2016-09-01 16:05:27
sigma有說(shuō)明的，1 NIH unit = 0.324 ±0.073 μg，一個(gè)vial是133 NIH，就是43ug左右，除以分子量36000，差不多一共1.2 nmol，按比例稀釋就行。

好的，真的太謝謝您了！

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5樓2016-09-01 20:33:12

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雪千尋丶

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親，有個(gè)問(wèn)題問(wèn)一下133 NIH units/vial這個(gè)是在哪里看到的哦

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6樓2016-09-01 23:19:59

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6樓: Originally posted by 雪千尋丶 at 2016-09-01 23:19:59
親，有個(gè)問(wèn)題問(wèn)一下133 NIH units/vial這個(gè)是在哪里看到的哦

我是在買(mǎi)回來(lái)的藥品瓶子上看到的。

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7樓2016-09-02 15:02:58

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7樓: Originally posted by 114110050 at 2016-09-02 15:02:58
我是在買(mǎi)回來(lái)的藥品瓶子上看到的。...

昨天看T6884-100UN的產(chǎn)品說(shuō)明那里面寫(xiě)的Molecular mass : 37.4 kDa

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8樓2016-09-02 16:20:50

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8樓: Originally posted by 雪千尋丶 at 2016-09-02 16:20:50
昨天看T6884-100UN的產(chǎn)品說(shuō)明那里面寫(xiě)的Molecular mass : 37.4 kDa...

親是在哪里看到的呀？我們一直都將凝血酶的分子量看為36000，我查的一些資料上說(shuō)的也是36000，希望我沒(méi)有弄錯(cuò)

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9樓2016-09-02 20:49:49

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9樓: Originally posted by 114110050 at 2016-09-02 20:49:49
親是在哪里看到的呀？我們一直都將凝血酶的分子量看為36000，我查的一些資料上說(shuō)的也是36000，希望我沒(méi)有弄錯(cuò)

...

http://www.sigmaaldrich.com/content/dam/sigma-aldrich/docs/Sigma/Product_Information_Sheet/1/t6884pis.pdf你看一下···

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10樓2016-09-03 13:49:13

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