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rose.no.9木蟲 (著名寫手)
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[求助]
waters e2695 HPLC使用問題
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做了兩天，試了各種辦法，請教各位蟲友、大俠： 樣品是微生物代謝產(chǎn)物的混合物，進(jìn)樣40uL, 線性梯度洗脫10%到90%，檢測波長280nm 1、請問不同樣品出現(xiàn)相同的峰是什么原因？進(jìn)了不同的樣品，出來的幾個峰都是一模一樣的，而且從30Min后基線飄得很高（這個通過搜索蟲友經(jīng)驗知道是因為甲醇含量變化導(dǎo)致UV吸收變化，但仍不知道怎么校正基線）。開始懷疑是柱子上有殘余，但是用純甲醇沖了半個多小時柱子，又用100%甲醇洗脫進(jìn)樣了10ul甲醇，發(fā)現(xiàn)沒有那幾個峰了；又進(jìn)了一針樣品，那幾個峰又出現(xiàn)了！而我自己的樣品的峰卻沒有（實際上我也不知道它們什么樣子，因為只要進(jìn)樣就出現(xiàn)那幾個峰）。又懷疑是我樣品濃度太小，進(jìn)了一針濃度很大的樣品，發(fā)現(xiàn)那幾個峰被壓得很矮但是仍然存在！樣品粗提物的質(zhì)量就那么多，現(xiàn)在是50mg/ml，200ul，如果再濃縮，會不會進(jìn)樣針吸不到樣品了呢？ 2、縱坐標(biāo)是AU，能改成mAU嗎？ |
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2樓2016-09-14 15:14:06
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