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[求助]
HPLC求助 已有4人參與
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有沒有HPLC大神在，求助一個HPLC基線漂移的問題。 搜過很多問題解決都沒有合適的辦法。 先上圖 這個是C18柱， 流動相是Phosphate， 洗脫的solvent是Methanol 第一次跑的時候，沒有洗脫梯度的時候基線是平的，這個圖是第二次跑的時候出現(xiàn)的，后面一直有這個問題。 我試過換新的柱子，換新的methanol，把methanol換成acetonitrile。 都一直有這個問題。整個色譜儀都用hexane 和 iso propanol 洗了超過4 個小時。依舊有這個問題。 壓力值也是穩(wěn)定的，有沒有大神能解答一下。。。急需。。。 這個圖是把柱子拿走以后40%的ACN+60% 純水跑的，基線一直在上升。中間那個壓力值是我暫停流動以后造成的，請忽略。 懸賞50金幣。。。 |
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2樓2016-09-27 08:04:15
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3樓2016-09-27 08:30:53
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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沒用Hex洗柱子吧？短時間，低濃度可以，太久太高容易把柱子洗廢了。 流動相，洗脫程序是自己摸索的，還是參考文獻？ 剛才看了下鳥嘌呤核苷用C18洗脫的時候常用，Ma-H2O， 添加磷酸或者其他改性。而且水的比例不低。 看你的圖，感覺拖尾太嚴重，改變一下流動相試試吧，個人感覺，你用Ma，ACN，Iso-pro，Hex這些都是不一定適合你的樣品，極性偏小。 推薦一個論文：夏秋采收荊半夏中鳥嘌呤核苷和次黃嘌呤核苷的含量比較 不知道你樣品濃度多少，感覺你這個像是進樣針污染，樣品濃度大，而且流動相洗脫能力弱。（Hex，Iso相對其他洗脫能力屬于很強的，但是不一定適合你的樣品）， 建議，更換洗針液，（甲醇-水等比例），裝上柱子甲醇水等比例沖洗柱子 |
4樓2016-09-27 09:43:06
w911227
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6樓2016-09-27 11:03:25
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8樓2016-09-27 15:06:15
9樓2016-09-27 17:42:35
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第二張圖小木蟲給我放倒了，140分鐘純水+Methanol，溫度也沒有波動，那個增加是5mA， 而且處于一直在增加的狀態(tài)，里面只有個precolumn 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
10樓2016-09-27 17:46:01
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