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shelly9018新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
Southern blot探針標(biāo)記不理想，但標(biāo)記效率檢測(cè)時(shí)，對(duì)照顯色也不理想？
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如題，新手做Southern blot探針標(biāo)記，用質(zhì)粒酶切回收片段作為模板，但一直回收的濃度都不高，最高的這次是54ng/ul，取了10ul按羅氏試劑盒操作步驟做探針，然后按試劑盒說(shuō)明做標(biāo)記效率檢測(cè)，結(jié)果如圖所示 經(jīng)過(guò)過(guò)夜顯色（16h），對(duì)照只出來(lái)三個(gè)濃度（10pg、3pg、1pg），而且顏色都很淡，所呈現(xiàn)的斑點(diǎn)顏色還不均勻，按試劑盒的說(shuō)明，顯色這么長(zhǎng)時(shí)間，至少0.1pg的顯示都應(yīng)該出來(lái)了，新制備的探針值只出現(xiàn)了理論最高濃度（10pg），如果說(shuō)探針的標(biāo)記不理想的話，主要的原因會(huì)是什么？ 對(duì)照的顯色也不理想，這個(gè)原因一直沒(méi)有想明白？？？請(qǐng)各位蟲(chóng)友多多幫忙，江湖救急啊   TX7VY][UBNED3LV06NH`U7A.jpg |
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