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涉水fish新蟲 (初入文壇)
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[交流]
卵巢RNA提取問題，電泳有拖尾 已有1人參與
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如題，取鯽魚卵巢組織塊用液氮速凍，每管加1mlTrizol，電動(dòng)勻漿機(jī)勻漿2-3次，promega的SV Total RNA Isolation System試劑盒，用DNase Ⅰ室溫（27度）處理30min，可是RNA質(zhì)量一直不好，5s很亮，28s和18s亮度分不出明顯差異，并且最主要的是，一直有拖尾（如圖）。嘗試過減少組織樣、勻漿更充分（多加珠子）、37度消化處理，均無(wú)法消除拖尾現(xiàn)象，且OD260/280在2.1~2.2之間，OD260/230在2.2左右。 因?yàn)橐寐殉睷NA構(gòu)建cDNA庫(kù)，對(duì)RNA質(zhì)量要求很高，不知道大家有沒有什么好的建議和方法，感激不盡！ 圖2中拖尾的為卵巢，其他的為同批次提取的其他組織 357FTN3M[7PK8~[MY`0PRIF.png FBDV5FAU9[2QDU%WRZH7D$S.png |
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新蟲 (初入文壇)
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2樓2019-07-17 15:30:29
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