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huangwensh木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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[交流]
蛋白表達(dá)和酶水平的結(jié)果差異大,怎么解釋
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| 各位前輩,最近做了一個(gè)藥的Western bolt 蛋白表達(dá)和酶水平的試驗(yàn),但是IC50值相差很大,怎么解釋 |
至尊木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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能夠理解為WB檢測(cè)的是目的酶的表達(dá)量,酶水平是只該酶的酶活檢測(cè)嗎,是兩個(gè)實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較嗎? 如果這個(gè)理解正確,這種現(xiàn)象是可能存在的,也是正常現(xiàn)象,不同的檢測(cè)方法會(huì)有系統(tǒng)偏差,只能確保結(jié)果和藥物濃度是有一致性響應(yīng)趨勢(shì), 可能的原因是很多,比如: WB的檢測(cè)相對(duì)來(lái)說(shuō)精密度差些,測(cè)量的結(jié)果有偏差 酶活檢測(cè)的是一個(gè)信號(hào)放大的過(guò)程,當(dāng)?shù)孜餄舛炔粔驎r(shí),不同濃度下的酶的信號(hào)放大效果可能不一樣,導(dǎo)致高濃度酶酶活測(cè)定的結(jié)果進(jìn)入假平臺(tái)期,IC測(cè)得結(jié)果偏小。 不論是什么結(jié)果,重復(fù)是放在首位的,當(dāng)幾次測(cè)量的結(jié)果都是這樣的趨勢(shì)時(shí),才會(huì)去推測(cè)可能的原因,祝好 |
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