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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » PCR相關 » 求助大神
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[求助]
求助大神 已有3人參與
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所需目的條帶1020，但總是擴不出來，退火溫度57，35個循環(huán)，如圖，求大神指點！這跑出來的是什么鬼？新人，勿噴��！ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2016-10-01 07:37:07
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增加循環(huán)數(shù)試試吧， 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
2樓2016-09-30 22:24:05
3樓2016-10-01 09:04:25
過煙云煙
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2016-10-01 22:51:23
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2016-10-01 22:51:23
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引物二聚體，用touch down或者梯度pcr吧，再有就是換新引物了 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2016-10-01 09:29:13
5樓2016-10-02 09:15:08
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xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2016-10-03 07:13:39
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引物二聚體，引物設計不是很理想，導致引物與模板配對的特異性下降，考慮提高退火溫度，或者重新設計引物，或者加入DMSO做為pcr增強劑試試看 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
6樓2016-10-03 07:01:45
小冀-
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【答案】應助回帖
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底下的帶是引物二聚體的帶，一般都會有的，不是什么大問題，你可以增加退火溫度試試，或者做個剃度pcr優(yōu)化一下條件，如果還是不行的話，就重新設計一下引物 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
7樓2016-10-05 09:07:17
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