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18242016312新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
酪活力測(cè)定～福林酚法 已有1人參與
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酪蛋白活力測(cè)定：采用福林酚法，以2% 酪蛋白為底物。用50 mM Tris-HCl（pH 7.5）將酶液稀釋合適的倍數(shù)，取100 μl稀釋好的酶液，加入同樣溫度的底物100 μl，恒溫下反應(yīng)10 min后，加入200 μl 0.4 M的三氯乙酸終止反應(yīng)，在40oC下保溫15 min后，10,000 rpm離心10 min，取100 μl上清液加入500 μl 0.4 M的碳酸鈉，混勻后加入100 μl福林試劑，混勻后在40oC保溫20 min，然后用紫外-可見(jiàn)吸收光譜儀測(cè)定660 nm處的吸光值。有誰(shuí)知道對(duì)照組該如何處理嗎？？？？？測(cè)菌液是否有胞外表達(dá)的蛋白，用此方法，取菌液該多的轉(zhuǎn)速離心？幾分鐘？？？？？ @天使托 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
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6樓2016-10-06 22:24:10
junqing
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對(duì)照組，添加順序100ul酪蛋白底物+200ul三氯乙酸+100ul酶液。可參照國(guó)標(biāo)蛋白酶制劑 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
2樓2016-10-01 09:50:57
wangzi4eve
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3樓2016-10-05 16:23:12
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我用的轉(zhuǎn)速10000g，是不是轉(zhuǎn)速過(guò)大，會(huì)把發(fā)酵液里的可溶蛋白離心下去？ 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
4樓2016-10-06 11:24:20
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