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[求助] 求助關(guān)于蛋白損傷的問(wèn)題已有2人參與

在做一個(gè)蛋白的納米籠
想請(qǐng)教下，如果想證明一蛋白籠被破壞該什么樣方法�。�

想過(guò)用透射電鏡，但是粒徑就十幾納米，就算破了應(yīng)該也看不到吧？
做過(guò)電泳，沒(méi)有出現(xiàn)新的條帶，但是條帶強(qiáng)度有明顯減輕。
還有沒(méi)有什么更直觀的方法證明我的蛋白籠被破壞了�。�
做圓二色譜有用嗎？原子力呢？求大神指教啊

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【求助/交流】關(guān)于蛋白純化透析的問(wèn)題已經(jīng)有2人回復(fù)

1樓 2016-10-05 17:34:32

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真的沒(méi)有人回嗎

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2樓2016-10-06 17:34:58

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自己頂一下

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3樓2016-10-06 18:04:40

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雖不懂，幫頂

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4樓2016-10-07 19:24:10

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用高梯度的尿素、胍等實(shí)現(xiàn)蛋白的變性，然后通過(guò)梯度透析，逐步實(shí)現(xiàn)蛋白的變性-復(fù)性。

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5樓2016-10-09 18:56:09

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百度百科，
蛋白質(zhì)復(fù)性
通常人們用于溶解包涵體肽鏈的液體是高濃度的變性鹽（一般是8M的尿素，或者6M的鹽酸胍）。

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6樓2016-10-09 18:58:25

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引用回帖:

5樓: Originally posted by yifeng1206 at 2016-10-09 18:56:09
用高梯度的尿素、胍等實(shí)現(xiàn)蛋白的變性，然后通過(guò)梯度透析，逐步實(shí)現(xiàn)蛋白的變性-復(fù)性。

沒(méi)有看懂

我考察的使活性氧對(duì)蛋白的損傷，已經(jīng)活性氧刺激過(guò)，但不知道怎么證明

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7樓2016-10-12 11:35:56

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【答案】應(yīng)助回帖

引用回帖:

7樓: Originally posted by so-solo at 2016-10-12 11:35:56
沒(méi)有看懂

我考察的使活性氧對(duì)蛋白的損傷，已經(jīng)活性氧刺激過(guò)，但不知道怎么證明...

圓二色譜、紅外光譜可以試試，還有非變性瓊脂糖凝膠電泳，DLS，zeta電位也可以試試

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8樓2016-11-03 17:54:03

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FPLC也行啊，簡(jiǎn)單點(diǎn)，如果用三種方法都沒(méi)什么變化就可以證明啦

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9樓2016-11-03 17:59:54

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