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質(zhì)粒的酵母直接轉(zhuǎn)化 已有1人參與
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實(shí)驗(yàn)材料 單菌落 試劑、試劑盒 PLATE溶液、載體DNA、轉(zhuǎn)化質(zhì)粒DNA 儀器、耗材 離心管、離心機(jī) 實(shí)驗(yàn)步驟 1、 用牙簽從平板中挑取單菌落（直徑2～3mm），轉(zhuǎn)移到1.5ml的無(wú)菌離心管中。 2、 將10μl載體DNA（100μg）與10μl轉(zhuǎn)化質(zhì)粒DNA混合，振蕩均勻。（若轉(zhuǎn)化DNA是用未經(jīng)RNA酶處理的“mini－prep DNA”方法制得，則不需加載體DNA）。 3、 加0.5ml PLATE溶液，振蕩。 4、 置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，室溫培養(yǎng)4天。 5、 置42℃下熱激15分鐘。 6、 以8000～10000r/min離心10秒沉淀細(xì)胞，小心棄去上清液，將細(xì)胞輕輕懸浮到200μl無(wú)菌蒸餾水，使細(xì)胞懸浮均勻，再直接將混合液涂選擇平板。 |
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2樓2016-10-08 00:37:26
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