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a15665819523銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
最近包裝病毒出現(xiàn)問題，脂質(zhì)體法 已有1人參與
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各位大神，我最近正在包裝病毒，可是每次用293T包裝時，加入脂質(zhì)體以及質(zhì)粒后，細胞開始出現(xiàn)漂浮，并且好多小黑點，感覺細胞狀態(tài)不好，沒有包裝病毒的293T則狀態(tài)良好，應(yīng)該不是培養(yǎng)基成分問題，而且這種病毒在收完之后感染其他細胞，其他細胞也會出現(xiàn)類似的狀況。 之后我又把質(zhì)粒過了0.22um的濾器之后包裝病毒，情況好一點點，但依然有類似狀況，懷疑可能脂質(zhì)體出現(xiàn)問題，但脂質(zhì)體過濾后貌似就不能work了，有沒有什么好的辦法解決脂質(zhì)體的問題？還有這種現(xiàn)象是支原體感染么？或是其他什么問題。。。 其大神解答。。。  |
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a15665819523
銅蟲 (小有名氣)
xn8008: 歡迎發(fā)帖交流 2016-10-12 17:47:52
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2樓2016-10-12 16:27:00
a15665819523
銅蟲 (小有名氣)
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3樓2016-10-13 08:42:32
【答案】應(yīng)助回帖
商家已經(jīng)主動聲明此回帖可能含有宣傳內(nèi)容|
你試試降低一下脂質(zhì)體的用量吧，可能是帶有一些毒性。另外DNA的純度是不是適合轉(zhuǎn)染，你再檢查一下。其實只要有細胞活下來就可以接著培養(yǎng)的，剛轉(zhuǎn)染的時候狀態(tài)不好是正常現(xiàn)象。 對于支原體污染，因為平常覺察不到，可以定期，比如一個月一次，檢測一下支原體污染。在此推薦炎熙生物的支原體PCR檢測試劑盒，采用通用引物，可檢測各種支原體感染，采用的是降落PCR法，只需一步反應(yīng)，比常規(guī)PCR更靈敏，全程僅需2-3個小時即可獲得結(jié)果。對于已經(jīng)受到支原體污染的細胞，可以使用炎熙生物的支原體清除劑，雙重殺菌機制，不易耐藥，還可以殺滅胞內(nèi)寄生的支原體，避免反復(fù)感染，而且使用也很方便，直接添加進培養(yǎng)基即可。www.biothrive.cn |
4樓2016-10-25 23:07:17
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