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餓的神啊新蟲 (著名寫手)
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[求助]
ClaI和XhoI雙酶切連接的問題 已有1人參與
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| ClaI和XhoI雙酶切連接一直不成功，分別插入T-載體雙酶切，沒有連接成功，后來把小片段的反向互補序列插入T-載體，也沒有連接成功。通過查資料，發(fā)現(xiàn)ClaI的GATC是個甲基化位點，識別位點（G）ATCGAT（C）前面如果是G或者后面是C則會被甲基化，需要用甲基化缺陷的Ecoli菌株，可問題是我發(fā)現(xiàn)我的引物是這樣的CC ATCGAT CGAAAGCTCGTCAGGGT，酶切位點和引物在一起正好構(gòu)成甲基化位點，這樣的話換甲基化缺陷的Ecoli菌株可以解決問題嗎？已經(jīng)折騰快一個月了，急求幫助！ |
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小冀-
版主 (著名寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
kuaile5420: 2016-10-18 18:07:32
kuaile5420: 2016-10-18 18:07:32
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直接換個酶切位點不就結(jié)了，多簡單 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2016-10-18 11:25:30
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