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[交流]
利用qPCR檢測野生型病毒和突變病毒的感染效率 已有1人參與
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| 我現(xiàn)在有SFV及其突變型的兩種病毒。我想看這兩個(gè)病毒感染細(xì)胞的區(qū)別，但是不知道病毒滴度，我可以用SFV病毒的某一個(gè)質(zhì)粒作為模板然后做一個(gè)qPCR，然后將質(zhì)粒模板濃度與Ct值做一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線。得到標(biāo)準(zhǔn)曲線后，用兩個(gè)病毒感染細(xì)胞后提取病毒RNA并做qRT-PCR，并利用Ct值將兩個(gè)病毒的量調(diào)整在一個(gè)數(shù)量級。請問各位大神這樣做行得通嗎？急急急 |
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許彥
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2樓2016-10-20 05:12:33
許彥
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1.你的原始毒株和變異株是不是用同一對引物？2.如果是同一對引物的話怎么區(qū)別是否突變。3.可以通過分光光度計(jì)來測定質(zhì)粒的量之后稀釋出四條或者更多的標(biāo)準(zhǔn)曲線。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2016-10-20 05:15:42
4樓2016-10-20 15:43:24
許彥
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我有一個(gè)建議。你按照你的設(shè)計(jì)的引物合成質(zhì)粒，然后用質(zhì)粒定標(biāo)準(zhǔn)曲線。就不用你去來回算了。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2016-10-20 19:10:23
6樓2016-10-21 08:19:29
許彥
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7樓2016-10-21 14:36:21
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