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zeyuanzi新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
畢業(yè)實(shí)驗(yàn)，轉(zhuǎn)化涂布不長(zhǎng)菌求分析 已有4人參與
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調(diào)整了一下卡那濃度，未切質(zhì)粒長(zhǎng)出菌了，但重組質(zhì)粒想不出來(lái)。求指導(dǎo)分析一下，都有什么原因？未酶切的質(zhì)粒長(zhǎng)菌至少說(shuō)明我的感受態(tài)沒(méi)問(wèn)題，有導(dǎo)進(jìn)去。也說(shuō)明我的未切質(zhì)粒正常。那是什么原因?qū)е挛业闹亟M質(zhì)粒長(zhǎng)不出菌？ dna和質(zhì)粒的比例？質(zhì)粒的酶切回收，去磷酸化沒(méi)做好？還是連接出了錯(cuò)？ 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
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2樓2016-10-21 14:42:58
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3樓2016-10-21 15:37:45
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4樓2016-10-21 16:23:19
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質(zhì)粒還好，回收dna差點(diǎn)，老師說(shuō)也可以用。我的比例算出來(lái)接近1:5,我加1ul質(zhì)粒，9ul dna 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
5樓2016-10-21 17:02:31
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6樓2016-10-21 17:03:25
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7樓2016-10-21 17:13:26
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8樓2016-10-21 17:32:22
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【答案】應(yīng)助回帖
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西門(mén)吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2016-10-25 22:17:14
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一般是實(shí)驗(yàn)要不要去磷酸化都沒(méi)什么關(guān)系。要么是比例問(wèn)題，要么是感受態(tài)問(wèn)題。pmol比例1：3-1：10都試試。如果不行，買感受態(tài)來(lái)轉(zhuǎn)化。質(zhì)粒還是跑個(gè)膠看看從膠上看不看得出來(lái)。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
10樓2016-10-23 08:30:45
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