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火麒麟90鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
BAC重組質(zhì)粒構(gòu)建問(wèn)題，電轉(zhuǎn)后不長(zhǎng)。
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| 各位大神，我現(xiàn)在在構(gòu)建BAC基因文庫(kù)，質(zhì)粒（8000bp）連接目標(biāo)片段（20-40kb）,利用T4連接酶將其在16℃連接20h，利用異丙醇和70%的乙醇洗滌兩次后除鹽，室溫下干燥，利用20ul H2O溶解，通過(guò)電轉(zhuǎn)導(dǎo)入到EPI300中，但是現(xiàn)在的問(wèn)題為沒(méi)有克隆子長(zhǎng)出。請(qǐng)問(wèn)各位大神有什么好的建議和解決方法。謝謝！ |
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水-水
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2樓2016-11-23 09:54:41
火麒麟90
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感受態(tài)是自己做的，電轉(zhuǎn)質(zhì)粒還可以。片段和質(zhì)粒連接沒(méi)有檢查過(guò)，不知道怎么查看！ 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
3樓2016-11-23 16:14:20
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4樓2016-11-23 16:15:06
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6樓2016-11-30 11:17:51
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7樓2017-07-31 16:43:42
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