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外源基因的誘導(dǎo)與表達(dá) pET32a載體
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求助大神： 最近在進(jìn)行一個(gè)關(guān)于酶基因的篩選工作，從原菌株里面克隆了幾個(gè)基因片段連接到載體pET32a，轉(zhuǎn)化宿主 ormDE3，嘗試了好多種表達(dá)條件，各種條件表達(dá)跑SDS－PAGE均有明顯目的條帶，但我需要拿含有我的表達(dá)基因的細(xì)胞去轉(zhuǎn)化我的糖底物看有沒有目的產(chǎn)物產(chǎn)生，但是一直都沒有任何反應(yīng)，老板覺得肯定是哪里有問題，讓我采用各種反應(yīng)體系做了幾個(gè)月了，還是沒有任何反應(yīng)，本人實(shí)在是實(shí)驗(yàn)小白，沒接觸過蛋白，實(shí)驗(yàn)室大家也不懂，大家有任何見解都可以給我說說唄，可憐臉....... |
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