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我想做4個(gè)片段之間的融合,求高手指點(diǎn) 已有3人參與
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我想做4個(gè)片段之間的融合,依據(jù)融合PCR設(shè)計(jì)四對(duì)引物,現(xiàn)在已經(jīng)將4個(gè)片段擴(kuò)增出來(lái)了,第一次將兩個(gè)片段進(jìn)行融合,1片段400多bp,2片段200多bp,第一步將1,2片段融合PCR,發(fā)現(xiàn)有好幾條雜帶,第二步分別用1-2片段融合回收產(chǎn)物、1-2片段融合未回收產(chǎn)物與片段3等體積混合,用酶,buffer,水補(bǔ)足25微升,不加引物,5個(gè)循環(huán),后加入酶,buffer,水,引物,補(bǔ)足50微升,后擴(kuò)增30循環(huán),發(fā)現(xiàn)沒有目的片段 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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