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huoqing銀蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
熒光探針問(wèn)題
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本人新手一枚，剛接觸熒光PCR（基因分型），希望各位能幫忙回答！ 未加Taqman探針時(shí)，引物可以擴(kuò)增出目的條帶；在Mx 3000P上同樣的體系和程序卻未檢測(cè)到熒光信號(hào)。對(duì)添加探針的反應(yīng)體系是否可以擴(kuò)出目的基因進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在常規(guī)PCR中擴(kuò)增出現(xiàn)非特異條帶，一條帶比目的條帶小，一條比目的條帶大，同時(shí)也有目的基因。求解釋?zhuān)?br /> Taqman MGB探針在常規(guī)PCR體系中是否具有引物的作用？即3‘端脫氧核糖核苷酸是否能在DNA聚合酶的作用下進(jìn)行延伸反應(yīng)？ 如果有了解的人能否告知熒光基團(tuán)和猝滅基團(tuán)在核苷酸上的具體位置，是否在形成磷酸二脂鍵的位置？ 在此先謝謝各位網(wǎng)友！ |
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2樓2016-11-16 06:27:48
huoqing
銀蟲(chóng) (初入文壇)
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3樓2016-11-16 10:03:21
huoqing
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4樓2016-11-16 11:23:16
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我覺(jué)得可能是這個(gè)MGB探針合成的有問(wèn)題，整個(gè)粹滅基團(tuán)有部分脫落，導(dǎo)致擴(kuò)增。可以重新合成試下 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
5樓2016-11-16 18:55:37
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6樓2016-11-18 08:36:46
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