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asd789333新蟲 (初入文壇)
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[求助]
使用UPLC建立分析方法時(shí)遇到的問題 已有3人參與
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我使用的是WATERS 的UPLC 柱子1.7um 長度5cm的柱子 現(xiàn)在正在分離花青素（一種帶糖的黃酮類物質(zhì)） 我在建立一個(gè)UPLC的分析方法 我的流動(dòng)相A 是3%的甲酸水（0.1%的TFA） B 是15%的甲醇乙腈 我現(xiàn)在遇到的問題是無論是何種比例的流動(dòng)相我都無法分開待測物質(zhì) 文獻(xiàn)報(bào)道 應(yīng)該有13種組分在里面 圖A 是純B 相沖的 流速0.02mL/min 圖B 這個(gè)是用95%的A 5%的B 等度沖的 流速0.02mL/min 現(xiàn)在我無論如何設(shè)置梯度 出峰總是在固定時(shí)間段 而我認(rèn)為所有的峰都集中到一塊了（圖） 我現(xiàn)在想請(qǐng)教的問題 1.我的流動(dòng)相的選擇存在問題嗎？是不是要把流動(dòng)相A的酸度在調(diào)高一點(diǎn)，這些流動(dòng)相是參考HPLC的方法 2.是不是梯度洗脫可以改變出峰時(shí)間，從而把峰都分開。 3.我要如何設(shè)計(jì)梯度，給不給說一下大概的想法 4.UPLC的流速正常在什么范圍內(nèi)，0.02mL/min 7min就出完峰，這個(gè)正常么？流速會(huì)不會(huì)太低。這個(gè)柱子是不是有問題。 5.HPLC的分析方法對(duì)UPLC方法的建立有參考價(jià)值嗎？ IMG_20161121_164049.jpg IMG_20161121_170023.jpg@wyy080214 |
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2樓2016-11-22 10:00:14
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UPLC本來出峰就很快的，新機(jī)器一秒能掃描兩百次，一兩秒一個(gè)峰都可以分開(當(dāng)然這只是儀器商說的。。。)，你的峰太寬才是問題。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
13樓2016-11-23 08:29:06
asd789333
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大神啊 那我現(xiàn)在應(yīng)該怎么辦？ 請(qǐng)問我該如何更換流動(dòng)相 更換完流動(dòng)相我下來該做些什么 我現(xiàn)在實(shí)在建立uplc的分析方法 真參考的文獻(xiàn)幾乎是HPLC的 柱子是2.1*50mm 1.7um的 真心跪求你的回復(fù)啊 做了半個(gè)月了 一點(diǎn)進(jìn)展也沒 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2016-11-22 11:42:05
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4樓2016-11-22 11:48:23
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5樓2016-11-22 11:48:59
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6樓2016-11-22 11:58:01
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7樓2016-11-22 12:03:25
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8樓2016-11-22 12:05:05
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9樓2016-11-22 12:06:42
10樓2016-11-22 12:38:48
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