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[求助]
經(jīng)過BCA定量后，WB時內(nèi)參依然不齊，而且異常詭異 已有3人參與
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小弟剛開始做WB實驗 具體步驟如下 首先樣品是前面師兄凍存在負八十里的， 分 正常組，模型組，給藥組 三組動物組織 每次蛋白分裝定量取20微克組織+200微升 RIPA+PMSF 剪刀盡量剪碎后超聲，冰上15min后離心，緊接著BCA定量 分裝時每管20微升的體系 蛋白量30~60微克，其余用LB和pbs補齊 所有操作都是盡可能的低溫 離心管離心機提前預冷 下面是重點 所有的內(nèi)參tubulin 全部都是 加藥組深 模型組其次 正常組最淺 提了三次蛋白了 做了8塊膠了 幾乎都是一毛一樣的趨勢 就不發(fā)多張圖了 雖然tubulin這么不齊 但是目的蛋白齊啊 本該是給藥組最深的目的蛋白 在正常組tubulin非常淺的情況下 硬生生的和目的 蛋白一個水平了 另外一個目的蛋白正常組也沒表現(xiàn)出和tubulin相似的 該有的少量 各位大神幫忙看看 小弟現(xiàn)在真是不知道怎么辦了 |
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2樓2016-11-22 14:38:46
6樓2016-11-23 16:25:11
3樓2016-11-22 14:39:16
感謝參與，應助指數(shù) +1
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4樓2016-11-23 09:19:59
star013 
新蟲 (知名作家)
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5樓2016-11-23 09:35:19
7樓2016-11-23 21:55:03
8樓2016-11-24 16:53:03
zhuzhu198807
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9樓2016-12-07 10:01:06
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10樓2018-03-09 12:37:59
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