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我做三親結(jié)合,受體菌無(wú)抗性
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| 我做三親結(jié)合,受體菌無(wú)抗性,自殺之粒(也就是用于構(gòu)建供體菌的)有kan抗性sacB基因,據(jù)說(shuō)可以利用蔗糖反篩選,是不是第一次是在KAN篩,第二次是不能在kan長(zhǎng),能在蔗糖上長(zhǎng)的就是需要的菌株呢?做過(guò)這方面的同學(xué),有沒(méi)有什么建議或看法?希望大家給與幫助,非常謝謝。 |
金蟲 (小有名氣)
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首先你的受體菌要有抗性 用你的受體菌的抗性和自殺質(zhì)粒的抗性第一次篩選 再用PCR驗(yàn)證 最后用sacB篩選 如果只用kan篩選長(zhǎng)出來(lái)的可能是自殺質(zhì)粒也可能是接合成功的 會(huì)長(zhǎng)很多 驗(yàn)證的時(shí)候很麻煩 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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