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[求助]
二抗為何要是多抗而不是單抗？ 已有1人參與
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新人求教。 用CoIP測蛋白相護(hù)作用，依次是PL， coip control ，coip experimental，WCE control，WCE experimental 一抗用的是0.4 μg/ml anti-HA antibody (12CA5; Roche) 第一次做的時候二抗用的是個單抗，結(jié)果如圖一， 然后老師說二抗應(yīng)該用多抗，所以重新strip再做，第二次的時候二抗用的是多抗（抗兔）。 請問為何這種情況下不能用單抗呢？ 另外我聽說單抗特異性強(qiáng)，那為何第一張圖用了單抗反而條帶多呢？ 謝謝 Co-IP 二抗為單抗.jpg COIP 二抗為多抗 .jpg |
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xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2016-11-29 11:41:10
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這個用單抗還是多抗有什么關(guān)系呢？只要是能免疫識別你的HA標(biāo)簽就可以啊。如果是coip，那你應(yīng)該用兩個蛋白的一抗分別作用，或者混合作用，要不怎么檢兩個蛋白？ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
2樓2016-11-29 08:43:48
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xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2016-11-29 11:41:16
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我也覺得二抗是單抗還是多抗無所謂啊。。。 嗯，因?yàn)橹皇菍?shí)驗(yàn)課，所以只做了coip，老師說如果要再確認(rèn)的話需要做一個reverse coip。 但是老師說實(shí)驗(yàn)室技術(shù)員提供了錯誤的二抗，本來應(yīng)該是多抗，但是他提供成了單抗，所以要重新做。 我查了一下，一抗是抗鼠的，二抗是抗兔的，所以應(yīng)該沒啥問題啊，不知道為何老師說是錯了，而從結(jié)果來看，換了多抗之后確實(shí)得到了想要的條帶啊。 |
3樓2016-11-29 08:59:32
田生帥菜
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4樓2016-11-29 11:20:45
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