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western blot總有很多雜帶
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自己做的蛋白質印跡總是有很多雜帶，樣品是裂解的組織蛋白，一抗是自己做的單抗和B actin。每次都是內參亮，但內參有些不那么亮的雜帶，而自己孵育單抗的泳道，一堆帶，都不太亮，根本區(qū)分不出哪條是目的條帶。我想知道自己的是背景過高嗎？我已經改進封閉條件，用3%，5%的BSA和5%的脫脂乳試過，室溫封閉4h，一抗二抗都用含1%BSA的PBST配置，每次洗5min/6次，一抗孵育過室溫搖床1h和2h.二抗40min.感覺不知道該如何處理背景過高了。 @biostar2009 @飛約瘋人院 @wizardfan 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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